مقایسه آنتی ژن های helicobacter pylori از نظر قدرت ایمنی زایی

بر اساس گزارش سازمان جهانی بهداشت helicobacter pylori به عنوان یک عامل مولد سرطان و دومین عامل سرطان معده در سراسر دنیا رده بندی شده است. عفونت با این ارگانیسم با گاستریت، زخم اثنی عشر، زخم معده و سرطان معده در ارتباط می باشد. عفونت معمولا در دوران کودکی اتفاق می افتد که در کشورهای در حال توسعه شایع تر از کشورهای توسعه یافته است. مطالعات نشان داده اند که سویه های h. pylori جدا شده در نقاط مختلف جغرافیایی از نظر آنتی ژنی با همدیگر تفاوت دارند. در میان روش های تشخیصی غیر مهاجم روش های جستجوی آنتی بادی های سرمی h. pylori توسط elisa اهمیت اپیدمیولوژی دارد. با این وصف، روش جستجوی آنتی ژن h. pylori در مدفوع بیماران اهمیت به سزایی در تشخیص عفونت فعال دارد. هدف این پژوهش بررسی قدرت ایمنی زایی آنتی ژن های h. pylori در حیوان آزمایشگاهی برای مصارف کاربردی است. در این پژوهش ابتدا ایزوله جدا شده از کودکان ایرانی با روش های بیوشیمیایی و روش pcr مورد شناسایی قرار گرفت. پس از انتخاب یک سویه بر اساس حضور ژن های ویرولانس، پروتئین های غشای خارجی ( omps ) با روش سارکوزیل و پروتئین های وابسته به غشا ( omps + imps ) با روش سونیکاسیون تهیه شدند. سپس 100 میکرو گرم از پروتئین های مزبور طی چند نوبت به خرگوش ماده سفید تزریق شد و نمونه سرم پس از نوبت سوم جمع آوری شد. تیتر آنتی بادی های ایجاد شده در حیوان بر علیه h. pylori با استفاده از elisa و پاسخ به انواع آنتی ژن ها با روش western blot انجام شد. در مرحله بعد باکتری به نمونه مدفوع منفی تلقیح شد و تست capture elisa با استفاده از آنتی بادی های پلی کلونال انجام گرفت و در نهایت با استفاده از نمونه های مشخص بیماران تست capture elisa صورت گرفت. تیتر آنتی بادی های پلی کلونال ضد h. pylori ایجاد شده در خرگوش پس از ایمنی سازی بر علیه پروتئین های سویه مزبور 1:600 و تعداد آنتی ژن های ایمنی زا مشاهده شده در western blot شامل حداقل 4 باند برای omps و 8 باند برای imps + omps بود که نتیجه بسیار قابل قبول برای مطالعات بعدی کاربردی می باشد. در این مطالعه سعی شد تا مراحل اولیه برای استفاده از آنتی بادی های پلی کلونال برای غربال نمونه های مدفوع بیماران انجام شود. علی رغم نتایج هماهنگ، این مطالعه نیاز به بهینه سازی تعداد زیادی فاکتور برای انجام غربال مدفوع بیماران با استفاده از تست elisa capture دارد.